你是否曾因科学课题研究的需要而想要培养细菌？你是否曾觉得培养细菌非常有趣而萌生过动手培养细菌的念头？也许你会觉得培养细菌很难实现，但其实培养细菌是件非常简单的事情，你只需要准备一些营养琼脂（一种独特的、为细菌生长供给养料的物质）、一些无菌培养皿和细菌即可。接下来一起学习如何在培养皿中养细菌吧！ ## 步骤 ### 1 准备琼脂。 琼脂是用于培养细菌的果冻状物质。它是从红藻中提取来的、可为多种细菌提供丰富营养物质并保证细菌大量繁殖的养料。有些种类的琼脂中添加了其他促进细菌繁殖的营养物质（例如羊血）。 实验中最常用到的琼脂是琼脂粉，你只需在每个用来培养细菌的4英寸培养皿中加入1.2克（大约半茶勺）琼脂粉即可。. 在耐热碗或隔热杯中，加入半茶匙的琼脂粉和60毫升（约1/4杯）的热水，将其搅拌均匀。如果你打算培养多盘细菌，你可以用一定倍数的热水按比例溶解琼脂粉来作为细菌的培养基。 将碗放到微波炉中，加热沸腾大约1分钟，取出，待其冷却至不在沸腾的状态。 当溶液准备妥当后，琼脂粉应当完全溶解，溶液整体呈清亮不浑浊的状态。 待琼脂粉溶液冷却几分钟后再进行后续步骤。[1] ### 2 准备培养皿。 培养皿是用透明玻璃或塑料制成的、用来培养细菌或细胞等的平底容器。培养皿由皿盖和皿底组成，其中皿底可插入到皿盖中。培养皿不仅可以防止外部污浊的空气污染培养物，还能将细菌产生的废气排出去，从而保证细菌的繁殖扩增。 培养皿在使用前必须被完全消毒并保持无菌的状态，否则会影响实验的进行和结果。新买的培养皿一般是经过预处理的，都是无菌且被塑料密封包装的。 打开培养皿的塑料包装，取出培养皿。打开皿盖，小心地将较热的琼脂溶液倒入培养皿中。倒入溶液的量只需覆盖皿底，能形成一层培养基即可。 迅速盖上皿盖，以防空气中的细菌污染培养基。将培养基冷却30分钟到2小时，直到琼脂溶液冷却并硬化成果冻状。[2] ### 3 将培养基冷藏保存。 如果你不打算立刻用该培养基培养细菌，那么将其冷藏保存，待到实验需要时再取出培养细菌。 将培养基放在冷藏冰箱中保存可以防止培养基中水分的蒸发（细菌需要潮湿的生长环境）。而且还能减缓琼脂培养基表面变硬的速度，以防在接种细菌时菌体遭到物理撕扯破裂。 将培养皿储存在冰箱里时，培养皿需要倒置。这样可以防止冷凝在皿盖上的水掉下来破坏细菌生长平面。[3] 琼脂培养基可冷藏数月。在你使用培养基之前，先将其从冷库中取出，待其温度到达室温后再接种样品。 ## 步骤 ### 1 将细菌接种到培养基中。 一旦琼脂培养基凝固成固体或冷藏的培养基恢复到室温，接下来你就可以接种细菌了。接种细菌的方式有很多，你可以通过直接接触接种或收集样品接种等方式来完成。 直接接触接种:直接接触接触就是用含有细菌的物体直接与培养基接触，将细菌传递到培养基上。最普遍的方式就是将手指（洗手前或洗手后皆可）轻放在培养基上。或者，你可以尝试剪下一点指甲、一枚旧硬币、一丝头发或一滴牛奶放在培养基上。你可以开动你的想象力，放上任何合适的带有细菌的物体。 收集样品接种:你可以从任何表面收集细菌样品，然后将其转移到培养基上。该法中，你仅需要一些棉签。你拿住棉签一端，并用棉签棉花那端沾取嘴巴里、门把手上、电脑键盘上或者遥控器按钮等任何你能想到的物体表面的细菌。然后将其涂在没有干裂的培养基表面。以上所取样品的地方都垢藏了大量的细菌，将其接种培养几天后，你就能看到有趣恶心的结果。 如果你愿意，你可以在一盘培养基上接种多个样品。在接种前，你需要在皿底上标记分出四个部分。然后在每个部分接种一个样品。 ### 2 标记并封闭培养皿。 当你接种完细菌后，你需要将皿盖盖上，并用胶布密封培养皿。 确保在每个培养皿的胶布上用马克笔标注好细菌来源等信息，否则，几日之后你将分不清培养细菌的来源。 你可以将培养皿放入拉链袋中，使其得到多层保护。这样可以防止潜在有害菌群的侵入，还不影响培养结果的观察。 ### 3 将培养皿放置在温暖避光的地方培养几天。 细菌的培养环境最好是温暖避光的培养箱。记住在细菌培养的过程中，培养皿要倒置，这样可以防止皿盖的水滴不会滴到培养基上影响细菌的培养。 培养的最佳温度是70到98华氏度(即20-37摄氏度)。如果你将培养皿放在温度较低的环境中，细菌的生长速度就会减慢。 细菌的培养时间最好是4-6天，这样能让其得到充分繁殖生长。一旦细菌开始生长繁殖，你也许能闻到一股独特的气味。 ### 4 记录你的实验结果。 几天后，你会发现每盘培养皿中都长满了多种多样、形态各异的微生物。 在实验记录本上记录你观察到的培养皿中的微生物。也许你能根据结果总结出哪里的细菌含量最高。 细菌最多的地方是你的嘴巴吗？是门把手吗？还是遥控器上的按钮？相信最终的结果能让你大吃一惊！ 如果你愿意，你可以测量菌落生长的速度。你可以在皿底用马克笔在菌落周围画圈。几天后，你就能得到一组同心圆。你可以依据此观察菌落的增长。 ### 5 测试抗菌药物的有效性。 本实验可被改变成一个有趣的实验，就是在培养皿中加入抗菌剂(洗手液、肥皂等等)以测试抗菌剂的有效性。 当你将细菌接种在培养基上后，用一根棉棒取一滴洗手液、消毒皂或家用漂白剂，滴在样品中间，然后按步骤培养细菌。 随着细菌的繁殖，你能看到在你滴下抗菌剂的地方形成一圈或一环没有细菌生长的区域。这就是所谓的“灭菌区”。 你可以通过对比灭菌区域的大小来比较杀菌剂的效率。被杀死的细菌越多，杀菌剂的效果越好。[3] ## 步骤 ### 1 采取适当的安全措施。 在你处理培养过细菌的培养皿之前，你需要采取适当的安全措施来保护自己。 尽管你培养的细菌大多无害，但是大菌落仍有一定的危险。所以在丢弃培养皿之前，你需要用家用漂白剂杀死细菌。 你需要带橡胶手套、戴护目镜以及穿着实验服或围裙以防漂白剂伤害你的双手、眼睛和衣服。 ### 2 将漂白剂倒入培养皿中。 打开培养皿的皿盖，向培养基上倾倒少量的漂白剂，使其杀死细菌。 小心不要将漂白剂撒到你的皮肤上，它会灼伤你的皮肤。 将无污染性的培养皿扔到拉链塑料袋中，然后扔到垃圾箱中。